蓉紫芋5号脱毒扩繁技术

　　 栽培技术

1. 培养基的配制 (1)茎尖组织培养基MS＋6－BA0.2毫克/升＋GA0.2毫克/升＋NAA0.1毫克/升＋白糖30克/升＋琼脂粉4克/升。 (2)继代扩繁培养基MS＋白糖30克/升＋琼脂粉4克/升＋B90.03克/升。pH值调至5.8,使灭菌锅的压力稳定在1.1千克/平方厘米,温度为120℃下灭菌20分钟,冷却后备用。 2. 脱毒处理 (1)播种选择 健康种薯在38～40℃恒温下处理10天,室内播种,待芽长至4～5厘米长时,剪取1～2厘米的壮芽。 (2)外植体消毒 将芽置于自来水下冲洗30分钟,用75%酒精冲洗30秒,无菌水冲洗3次,在超净操作台上用0.10%HgCL浸泡12分钟,无菌水冲洗6次,用滤纸吸干水分,在解剖镜下剥离至露出圆滑生长点,用解剖刀从0.1～0.5毫米处下刀(带一个叶原基),接于制备好的培养基上,每瓶接种1～2个生长点。 (3)茎尖培养 把接种好的培养瓶置于光照强度1000～3000勒克斯,每天16小时,温度保持22～25℃的培养架上培养。30～40天后,茎尖转绿,看见明显伸长的茎和叶,这时可转入普通MS培养瓶内。经3～5个月可发育成具4～5片叶的小植株,小苗长至6～7厘米时,一个植株编一个号进行转接,转接一定数量后,同一编号瓶苗保留一部分,另一部分进行病毒检测。 (4)病毒检测 经病毒检测不带病毒的株系可作基础苗进行扩繁,未脱毒株系淘汰。 3. 脱毒瓶苗的扩繁 (1)扩繁前的准备 接种室内要定期喷洒75%酒精进行消毒,接种前清洗地面,用75%酒精擦拭台面和台顶,脱毒基础苗用75%酒精棉擦拭培养瓶后放在台面上,打开风机开始吹风,灼烧支架、剪刀和镊子等接种工具10分钟,放在台面上冷却,打开室内和台上紫外灯,照射30分钟进行室内消毒。 (2)接种扩繁准备 工作就绪后,工作人员用肥皂洗净手,进入接种室,点燃酒精灯,用75%酒精棉擦拭双手,灼烧接种工具,在超净工作台上打开脱毒基础苗瓶盖,灼烧瓶口,每节剪一段,用镊子将茎段迅速插入制备好的培养基上,然后封瓶绑扎,注明品种、日期。 4. 蓉紫芋5号脱毒瓶苗全日光培养 (1)全日光培养提供的光照条件 在阳光培养室进行日光培养,强光有利于马铃薯脱毒瓶苗的生长,在一定光照强度范围内,光照愈强,瓶苗生长愈健壮,移栽成活率愈高。在同等培养条件下,蓉紫芋5号的生长要比其它品种晚15～20天,大概45～50天长到10厘米左右,可以出瓶苗进行移栽,生产脱毒原原种。它需要的光照强度最好控制在3000勒克斯。 (2)全日光培养提供的温度条件 由于温室效应,日光温室内的温度远远高于人工光照培养室,春秋季节比较适合瓶苗生长。夏季温度过高,培养瓶内高温高湿易造成瓶内植株气生根大量生长,瓶苗过早老化,培养基过早变干,影响瓶苗的质量,因此需要人工调节。利用控调,其温度控制在22～28℃为宜,通过人工调节可以满足脱毒瓶苗生长对温度的需求。 备注 (通联:成都市农林科学院作物研究所温江区611130)